盤點(diǎn)SPR抗體親和力成熟的幾種常用策略

　　抗體親和力成熟的概念在我們進(jìn)行相關(guān)抗體制備的過程中常常會用到，這個(gè)技術(shù)能在一定程度上解決抗體質(zhì)量方面的問題，也能提升表達(dá)的效率。而想要實(shí)現(xiàn)抗體親和力成熟，必須對天然抗體有充分的了解，同時(shí)知道其體內(nèi)成熟的原理，然后通過模擬天外可能出現(xiàn)和存在的一些變化，從而通過相關(guān)條件來促進(jìn)抗體的體外成熟。

　　對于天然抗體來說，親和力成熟一般分為體細(xì)胞高頻突變和克隆選擇兩個(gè)過程，想要抗體出現(xiàn)親和力成熟，抗原的刺激起著至關(guān)重要的作用。所以，我們在進(jìn)行體外抗體親和力成熟時(shí)，也常常會利用到相關(guān)策略。下面，普健生物就和大家具體聊聊有關(guān)抗體體外親和力成熟的幾個(gè)策略。

　　策略一：隨機(jī)突變

　　1、錯配PCR。通過改變PCR的反應(yīng)條件，從而提升核酸發(fā)生錯配的幾率，最終將隨機(jī)突變引入到基因序列中;

　　2、DNA改組。通過對抗體基因進(jìn)行脫氧核酸酶I切片，隨后在進(jìn)行PCR擴(kuò)增，從而完成抗體基因的突變;

　　3、鏈改組。也叫鏈天技術(shù)，其中一條輕重鏈不變，但是對另外一條輕重鏈進(jìn)行重組和配對，從而提升抗體親和力(通常會將噬菌體展示技術(shù)與此技術(shù)結(jié)合使用);

　　策略二：定向引入

　　也叫CDR重組。在抗體親和力成熟的過程中，細(xì)胞內(nèi)的高頻突變區(qū)并非均勻分布，而是主要集中在直接接觸的部位。因此，這樣既能獲得足夠多的突變多樣性，又不會破壞蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)。所以，我們可以通過在CDR區(qū)引入多個(gè)抗體，再通過抗體庫進(jìn)行CDR區(qū)的多次重組，這樣就能達(dá)到親和力成熟的目的;

　　所謂的抗體親和力成熟的過程，其實(shí)就是一個(gè)體外分子進(jìn)化、多樣化和擴(kuò)增的過程，這個(gè)過程能夠得到高親和力的抗體，使得低劑量藥劑要過增強(qiáng)的作用?？贵w親和力成熟，能增加治療效果，減少各種毒副作用，在抗體藥物研發(fā)過程中有著至關(guān)重要的作用。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供SPR抗體檢測服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。