穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建

細(xì)胞轉(zhuǎn)染，是將外源分子(如 DNA,RNA 等)導(dǎo)入真核細(xì)胞中的一種技術(shù);

轉(zhuǎn)染分為：瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染

瞬時轉(zhuǎn)染：指外源 DNA 或 RNA 轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞后不整合到宿主染色體中進(jìn)行外源目的基因的表達(dá)

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染：指外源 DNA 轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞后將外源目的基因整合到宿主染色體中進(jìn)行表達(dá)

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的特點(diǎn)：

1. 目的基因整合到染色體上，需要使用線性 DNA(線性 DNA 雖然比超螺旋狀的 DNA 轉(zhuǎn)入量低，但整合率高)

2. 外源 DNA 整合到宿主細(xì)胞染色體中大約為 1%，通常需要通過一些選擇性標(biāo)記反復(fù)篩選，才能得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的同源細(xì)胞系

3. 隨宿主細(xì)胞基因組復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯，并被穩(wěn)定遺傳

4. 用于獲得穩(wěn)定表達(dá)的外源基因的單細(xì)胞克?。喝绱笠?guī)模蛋白質(zhì)的合成，長期的藥理學(xué)研究遺傳機(jī)制的研究等

穩(wěn)定細(xì)胞株：一般是將外源 DNA 克隆到具有某種抗性或者選擇基因的載體上，載體被轉(zhuǎn)染到宿主細(xì)胞并整合到染色體中，用載體中所含的選擇標(biāo)志進(jìn)行篩選，篩選得到可穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株

穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建流程

高質(zhì)：外源基因嚴(yán)格鑒定，細(xì)胞來源清晰，無污染

高產(chǎn)：重組蛋白 / 抗體表達(dá)量可快速優(yōu)化至 2g/L 以上穩(wěn)定表達(dá)

穩(wěn)定：獨(dú)有的 GS 穩(wěn)轉(zhuǎn)系列載體配合 MSX 藥物篩選，實現(xiàn)穩(wěn)定傳代 15 代以上

快速：篩選高產(chǎn)細(xì)胞株，周期短至 3 個月

靈活定制：可針對重組蛋白 / 抗體全長或片段進(jìn)行個性化表達(dá)

經(jīng)驗豐富：專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊，已成功為國內(nèi)外多家醫(yī)藥公司和研究單位構(gòu)建交付穩(wěn)定細(xì)胞株

多篩選系統(tǒng)：G418/ 潮霉素 / 嘌呤霉素篩選系統(tǒng)，GS/DHFR 雙基因篩選系統(tǒng)等

構(gòu)建生產(chǎn)重組抗體的CHO穩(wěn)定細(xì)胞株