單克隆抗體純化的原理及其具體操作步驟盤點

　　單克隆抗體制備后，我們都需要對所得抗體進行相應的純化工作，只有提純，才能讓減少抗體的雜質(zhì)，并提升抗體的作用效果?？梢哉f，抗體純化是抗體必不可少的過程。那么，您知道怎么做抗體純化嗎?抗體純化的具體操作步驟是怎樣的?今天普健生物就和大家具體聊聊。

　　我們知道，抗體主要來源于血清，通過反復想動物體內(nèi)注入抗原產(chǎn)生。然后，對血清進行相關抗體的提取，這個過程就是抗體純化。

　　抗體純化的原理：

　　抗體純化的原理主要是根據(jù)蛋白的一些性質(zhì)不同，將其從混合液中提取出來的方式。比如利用蛋白分子大小不同、PH溶解值不同、溶解度不同、吸附性質(zhì)不同、生物親和力不同等一系列的手段，將其從溶液中提取出來的方式。

　　抗體純化的具體步驟：

　　1、蛋白提取

　　通過手段破碎細胞，使得蛋白得以釋放出來。通常利用裂解緩沖液破碎細胞，而后通過離心等方法去除細胞碎片，再將蛋白從裂解液中溶解出來;

　　2、抗體富集

　　通過層析的方式，使得抗體更集中。常見的方法有親和層析(利用抗體及其特異性之間的特異性結合)、離子交換層析(利用抗體與離子交換介質(zhì)之間的電荷相互作用來實現(xiàn)富集)、尺寸排除層析(根據(jù)分子大小差異，利用多孔介質(zhì)篩選);

　　3、純化和濃縮

　　通過透析膜將富集的抗體從介質(zhì)中洗脫出來，并去除鹽離子等小分子雜質(zhì)，之后在利用濃縮裝置，將目標抗體濃縮到較小的體積;

　　4、純化驗證

　　通過SDS-PAGE、Western blot等手段，驗證抗體的分子量以及特異性結合的能力;

　　總的來說，抗體純化是一個非常復雜的過程，我們需要結合抗體的具體情況選擇具體的純化方法，這樣不僅能節(jié)約大量的時間，而且能夠有效降低其成本投入。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供單克隆抗體純化服務，如果您有相關需求，歡迎來電咨詢。