單B細(xì)胞技術(shù)的工作流程是怎樣的?

　　單B細(xì)胞技術(shù)是現(xiàn)階段單克隆抗體制備的主要方法，其保留了輕重鏈可變區(qū)的天然配對，具備快捷、細(xì)胞數(shù)量少、高效等優(yōu)勢。單B細(xì)胞技術(shù)通過直接擴(kuò)增單B細(xì)胞的VH和VL編碼基因，從而生產(chǎn)出高質(zhì)量的單克隆抗體。那么，單B細(xì)胞技術(shù)的具體流程是怎樣的?

　　1、單個B細(xì)胞分離

　　從淋巴組織中分離出單B細(xì)胞，而后通過顯微操作、激光捕獲顯微切割以及熒光激活細(xì)胞分選等技術(shù)，中挑選出具備特異性的細(xì)胞;

　　2、單B細(xì)胞抗體測序及克隆

　　通常我們會采用96孔板進(jìn)行單細(xì)胞的cDNA合成，而后通過相應(yīng)的技術(shù)手段對其進(jìn)行擴(kuò)增。而后將表達(dá)載體轉(zhuǎn)染到哺乳動物細(xì)胞中，而后對單克隆抗體進(jìn)行體外表達(dá);

　　3、抗體表達(dá)及篩選

　　鑒定抗體片段的特異性和生物活性，而后將攜帶有目的抗體的表達(dá)載體在對應(yīng)的表達(dá)載體中進(jìn)行表達(dá)。

　　其實(shí)大家不難看出，單B細(xì)胞技術(shù)開發(fā)和雜交瘤細(xì)胞抗體表達(dá)有著很多相似之處，只是在細(xì)胞制備最初階段有著一定的區(qū)別，之后的過程都非常的類似。作為現(xiàn)階段能夠制備高質(zhì)量單克隆抗體的熱門方式，單B細(xì)胞技術(shù)將會得到進(jìn)一步的開發(fā)，活得更好的制備方式。普健生物專業(yè)為您提供單B細(xì)胞單克隆抗體制備服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。