哺乳動物蛋白表達瞬時轉(zhuǎn)染與穩(wěn)定轉(zhuǎn)染之間有哪些不同?

　　我們在利用哺乳動物表達蛋白時，因為其能夠更好的促使蛋白進行正確的折疊和修飾功能實現(xiàn)，所得所得蛋白更加接近天然蛋白的狀態(tài)，所以，利用其制備的藥品在效果方面更好。我們知道，在利用哺乳動物蛋白表達系統(tǒng)時，常常會通過兩種方式：瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。那么，這兩種方法有哪些方面的不同呢?

　　瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染之間有哪些不同?

　　其實就操作而言，瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染大體相同，都是將目的蛋白轉(zhuǎn)染到哺乳動物體內(nèi)，利用其蛋白表達過程表達目的蛋白。但是，瞬時轉(zhuǎn)染并沒有將目的蛋白轉(zhuǎn)染到細胞染色體上，而是轉(zhuǎn)染至游離的載體上，這樣能夠讓我們在短時間內(nèi)獲得大量目的蛋白。這個方法只能短時間內(nèi)獲得蛋白，但是隨著細胞的繁殖，會導(dǎo)致外源基因的丟失，最終無法生產(chǎn)目的蛋白;

　　而穩(wěn)定轉(zhuǎn)染則是將目的蛋白轉(zhuǎn)染到細胞染色體上，而后隨著原細胞蛋白的表達而表達。這個方法不會造成目的基因的丟失，能夠長期穩(wěn)定地進行目的蛋白表達;

　　瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染在操作上存在哪些方面的不同?

　　1、瞬時轉(zhuǎn)染選擇的質(zhì)粒不需要有抗性，而穩(wěn)定轉(zhuǎn)染所需質(zhì)粒需要有一定的抗性來進行后期的克隆株篩選;

　　2、瞬時轉(zhuǎn)染的操作相對簡單，只要在質(zhì)粒構(gòu)建好后，通過細胞復(fù)蘇、轉(zhuǎn)染、培養(yǎng)、蛋白純化等一系列的操作后即可獲得目的蛋白。而穩(wěn)定轉(zhuǎn)染則需要構(gòu)建好質(zhì)粒線性化，導(dǎo)入細胞，而后將轉(zhuǎn)染后的質(zhì)粒與細胞進行融合，再通過篩選、培養(yǎng)等一系列的步驟后再構(gòu)建相應(yīng)的穩(wěn)定細胞系(穩(wěn)定轉(zhuǎn)染可以實現(xiàn)長期穩(wěn)定地生產(chǎn)蛋白);

　　總的來說，我們在進行哺乳動物蛋白表達時，完全可以根據(jù)需求來進行瞬時轉(zhuǎn)染或穩(wěn)定轉(zhuǎn)染，當(dāng)短期需要蛋白時，選擇瞬時轉(zhuǎn)染，長期需要蛋白時，選擇穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。當(dāng)然了，具體選擇也需要結(jié)合相關(guān)成本和技術(shù)支持來選擇。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供哺乳動物蛋白表達服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。