雜交瘤測(cè)序的定義及其制備流程-普健生物

　　雜交瘤測(cè)序是單克隆抗體制備中常用的一種手段，通過對(duì)雜交瘤細(xì)胞中的抗體基因序列進(jìn)行測(cè)序，而后記錄其結(jié)構(gòu)信息的方式。而后在后續(xù)的抗體制備過程中，直接采用這個(gè)序列來(lái)制備抗體的方式。雜交瘤測(cè)序技術(shù)對(duì)于抗體的特異性和功能性是非常重要的，那么，其具體測(cè)序是怎樣的呢?今天，普健生物在這里和大家具體聊聊。

　　1、雜交瘤細(xì)胞構(gòu)建。提取免疫后的淋巴B細(xì)胞，而后將其與骨髓瘤細(xì)胞融合，形成雜交瘤細(xì)胞;

　　2、細(xì)胞篩選。對(duì)所得雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，而后提取出其中融合成功的雜交瘤細(xì)胞(可以通過在其中添加抗生素等方法來(lái)實(shí)現(xiàn))，而后對(duì)其進(jìn)行細(xì)胞株培養(yǎng);

　　3、DNA或RNA提取。從篩選所得的細(xì)胞株中提取出DNA或RNA;

　　4、擴(kuò)增。使用聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)，而后對(duì)特定抗體基因片段進(jìn)行擴(kuò)增，以便于從復(fù)雜的基因組序列中快速擴(kuò)增出特定序列;

　　5、抗體測(cè)序。對(duì)所得抗體基因片段進(jìn)行測(cè)序(可以使用傳統(tǒng)的測(cè)序技術(shù)，也可以使用高通量的下一代測(cè)序技術(shù));

　　6、序列分析。多所得抗體序列進(jìn)行分析，識(shí)別其中的可變區(qū)和常數(shù)區(qū)，對(duì)抗體的特異性和功能性進(jìn)行進(jìn)一步分析;

　　通過如上的步驟就能夠讓我們獲得單克隆抗體的序列信息，通過雜交瘤測(cè)序，能夠?yàn)槲覀兒罄m(xù)的研究提供重要的數(shù)據(jù)支持?？偟膩?lái)說，所得序列可以讓我們保持后期抗體制備的特異性和穩(wěn)定性，能夠在最大程度上降低抗體批次之間的差異性。如果您有相關(guān)雜交瘤測(cè)序的需求，歡迎聯(lián)系普健生物。