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目前的生物行業(yè)發(fā)展可謂是紅紅火火，幾乎成為全球矚目的熱點(diǎn)，甚至喬布斯都預(yù)言：下一個(gè)經(jīng)濟(jì)發(fā)展的爆點(diǎn)必然是生命大健康行業(yè)。而隨著人們生活水平的不斷提高，人們對(duì)健康的渴望也變得越發(fā)迫切起來(lái)。但是，我們每天都在說(shuō)蛋白純化，但是，奇怪的是我們好像日常用不上它，它到底是用來(lái)干嘛的呢?今天普健生物就和大家具體聊聊。
其實(shí)蛋白純化技術(shù)在生物化學(xué)領(lǐng)域有著重要的作用，也是使用最為廣泛且重要的技術(shù)之一。打個(gè)比方，一個(gè)真核細(xì)胞可以產(chǎn)生數(shù)以千計(jì)的蛋白，這些蛋白的作用可謂千奇百怪，而且含量也是各不相同，有的蛋白含量很高，有的甚至只有幾個(gè)，而且這些蛋白之間會(huì)相互影響，所以，如果我們想要研究某個(gè)蛋白的特性，就需要將其中的蛋白和非蛋白分離出來(lái)，這個(gè)過(guò)程也就是我們常說(shuō)的蛋白純化。
蛋白純化的方法介紹：
一、根據(jù)溶解質(zhì)不同的分離方法
1、鹽析法。簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)，不同蛋白會(huì)隨著鹽濃度的不同而溶解度變化的情況，也就是我們常說(shuō)的巖溶。當(dāng)鹽濃度持續(xù)升高時(shí)，蛋白的溶解度會(huì)出現(xiàn)不同程度的下降并析出，這個(gè)現(xiàn)象就稱(chēng)之為鹽析;
2、等電點(diǎn)沉淀法。不同蛋白在經(jīng)典狀態(tài)下的斥力最小，溶解度也最小，也就是說(shuō)，而不同蛋白的等電點(diǎn)是不同的。所以，我們可以通過(guò)調(diào)節(jié)溶劑的PH值，使得其達(dá)到某一蛋白的等電點(diǎn)，而造成沉淀的現(xiàn)象。只是，如果單獨(dú)的使用這個(gè)方法效率較高，我們通常會(huì)結(jié)合鹽析法來(lái)使用以提交其效率;
3、低溫有機(jī)溶劑沉淀法。在溶液中添加甲醇、乙醇或丙酮等有機(jī)溶劑，當(dāng)達(dá)到一定的濃度后，可以造成一些蛋白溶解析出(PS：這個(gè)方法雖然在效果上要優(yōu)于鹽析法，但是容易造成蛋白變質(zhì)，需在低溫環(huán)境下使用);
二、根據(jù)分子大小的分離方法
1、透析、超濾。其實(shí)就是采用半透膜將大小不同的蛋白質(zhì)分開(kāi)的方法。當(dāng)然了，如果覺(jué)得透析的速度太慢，可以考慮采用超濾的方式，也就是采用高壓或離心機(jī)的原理，使得水和小分子強(qiáng)行通過(guò)半透膜，留下我們需要的蛋白產(chǎn)品的方式;
2、凝膠過(guò)濾法。有可以稱(chēng)之為分子篩層析法。它是根據(jù)分子大小進(jìn)行分離的方式，采用填料葡萄糖凝膠和瓊脂糖凝膠的方式;
三、根據(jù)蛋白帶電性質(zhì)不同進(jìn)行分離
1、電泳法。不同蛋白在同一PH環(huán)境下的電量不同，使得其在遷移時(shí)分部會(huì)變得不同。所以，我們可以采用這個(gè)方式對(duì)其進(jìn)行分離;
2、例子交換層析法。用例子交換層析柱對(duì)蛋白溶液進(jìn)行分離時(shí)，會(huì)將帶有與離子交換劑相反的蛋白吸附出來(lái)，然后再采用改變PH值或是離子強(qiáng)度的方法將蛋白洗脫下來(lái);
四、根據(jù)蛋白特異性的分離方法
也就是親和色譜法，其實(shí)就是一套多種方法的聯(lián)合使用方式。通過(guò)對(duì)組織搗碎、超聲波處理、反復(fù)凍融，最后通過(guò)化學(xué)處理方法的方式，后面我們會(huì)和大家具體聊聊有關(guān)這個(gè)方法的詳細(xì)過(guò)程，在這里我們就不一一贅述了;
總的來(lái)說(shuō)，無(wú)論采用那種方法，都需要結(jié)合蛋白的特性來(lái)挑選合適的方法，這樣不僅能提純出我們需要的蛋白產(chǎn)品，更是能夠在極大程度上節(jié)約我們的處理時(shí)間和物料投入。普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供蛋白純化服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。
