盤點(diǎn)重組蛋白純化時(shí)常用的幾種方法

　　在“重組蛋白之蛋白純化的原理與步驟”一文中，我們和大家詳細(xì)介紹了蛋白純化的相關(guān)原理和具體步驟，相信大家對(duì)蛋白純化也有了初步的了解。那么，有關(guān)重組蛋白純化的方法您了解多少呢?今天，普健生物就在這里和大家具體聊聊。

　　我們知道，不同的蛋白在物理、化學(xué)、生物活性等方面都有著極大的不同，因?yàn)槠浒被嵝蛄泻蛿?shù)量的不同，連接氨基酸殘基可能是荷正電也可能是荷負(fù)電的、極性或是非極性的、親水或是疏水的。所以，我們完全可以根據(jù)它們的這些特點(diǎn)來對(duì)其進(jìn)行相關(guān)純化工作。

　　方法一：超速離心法

　　超速離心法主要用于分離亞細(xì)胞和蛋白，利用個(gè)例子在梯度液中沉降速度不同的原理，使得不同沉降速度的顆粒處于不同密度的梯度層中，從而達(dá)到分離的目的;

　　方法二：選擇性沉淀法

　　選擇性沉淀法其實(shí)就是利用各種沉淀劑或者通過改變某些條件來促使分層沉淀，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)蛋白的純化。

　　常用的方法有鹽析沉淀法、有機(jī)溶劑沉淀法、水溶性非離子型聚合物沉淀法等方法來實(shí)現(xiàn)蛋白純化操作，具體方式及其優(yōu)劣我們將在后文中和大家詳細(xì)介紹;

　　方法三：凝膠層析法

　　凝膠層析法也被稱為分子篩過濾法，其實(shí)就是利用分子大小的不同，將蛋白分離出來。相比其他方法來說，凝膠沉淀法操作相對(duì)溫和，對(duì)蛋白造成的影響相對(duì)要小一些;

　　方法四：離子交換層析法

　　離子交換層析法是利用分子所含電荷的吸附作用不同來實(shí)現(xiàn)。我們和大家提到過，蛋白的等電點(diǎn)不同，其所帶電荷量也是各不相同的，所以，通過在纖維素上加入電荷位置，從而實(shí)現(xiàn)吸附蛋白的效果;

　　方法五：親和層析法

　　親和層析法其實(shí)就是利用生物大分子的特異性，類似親和力結(jié)合的方式來實(shí)現(xiàn)蛋白的吸附;

　　總的來說，上面五種方法所針對(duì)的方面不同，其實(shí)也是針對(duì)各類蛋白在大小、特性等方面的不同來實(shí)現(xiàn)蛋白的純化操作。對(duì)于不同的純化需求來說，五種方法可謂各具優(yōu)勢，需要有選擇地進(jìn)行選擇。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供重組蛋白純化服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。