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在我們使用大腸桿菌表達重組蛋白時，我們需要確定其的產(chǎn)生、定位、培養(yǎng)基以及產(chǎn)量進行確定，以便于其后期簡化工作的進行。所以，我們不僅需要對蛋白、培養(yǎng)液等物質(zhì)進行小規(guī)模地分析。對于那些分析出來有利于誘導的條件進行保留，并選擇合適的方法對其進行目的蛋白純化。
如何對重組蛋白的生長和誘導?
1、按需求準備pET重組子培養(yǎng)液。直接從經(jīng)辦或甘油保存菌中提取一些細胞加入到抗生素培養(yǎng)液中;
2、在37度環(huán)境下對培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。提取3ml培養(yǎng)液，并將其加入到含有抗生素的100ml培養(yǎng)液中;
3、在搖床上進行無菌培養(yǎng)。在適當溫度下降培養(yǎng)基放在搖床上培養(yǎng)2-3小時，在培養(yǎng)過程中要不定期地提取樣品進行檢測;
4、分批次培養(yǎng)。在進行誘導之前，需要將培養(yǎng)液分成兩份，一份加入IPTG，另一份不加，通過對照，看其具體差異。然后，保持其在適當溫度下進行培養(yǎng);
總的來說，重組蛋白進行誘導表達時，不僅要測試好相應的培養(yǎng)環(huán)境，更是需要進行不同批次的檢測和對比，這樣才能保證最佳的制備環(huán)境。當然了，對于不同的蛋白，需要提供不同的環(huán)境，這樣才能在更大程度上保證蛋白的表達。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供重組蛋白表達服務，如果您有相關需求，歡迎來電咨詢。
