重組蛋白表達(dá)時(shí)要怎么選擇合適的表達(dá)載體呢?

　　重組蛋白表達(dá)在現(xiàn)代生命科學(xué)研究中起著至關(guān)重要的作用，通過DNA重組技術(shù)來產(chǎn)生所需目的蛋白的方式。而對于重組蛋白表達(dá)來說，表達(dá)載體是基因表達(dá)所需的必要元素，比如啟動(dòng)子、序列、終止密碼子、轉(zhuǎn)錄終止序列等。就目前來說，有多種表達(dá)系統(tǒng)選擇，比如大腸桿菌、昆蟲細(xì)胞、哺乳動(dòng)物、枯草芽孢桿菌以及酵母表達(dá)系統(tǒng)，需要結(jié)合不同情況來選擇載體。

　　那么，我們具體通過哪些因素來選擇表達(dá)載體呢?

　　1、表達(dá)系統(tǒng)

　　對于不同表達(dá)系統(tǒng)來說，其選擇的載體是各不相同的，所以，需要結(jié)合不同的系統(tǒng)來選擇合適的載體;

　　2、載體大小

　　一般這個(gè)時(shí)候，我們需要結(jié)合DNA片段是大還是小，為了操作方便，我們一般采用載體相對較小的分子，這樣所得的蛋白更穩(wěn)定;

　　3、蛋白標(biāo)簽

　　蛋白標(biāo)簽我們一般選擇較短的肽段，只有有了這類標(biāo)簽，對于那些缺乏檢測方法的蛋白來說，能夠輕松實(shí)現(xiàn)檢測;

　　4、蛋白應(yīng)用

　　根據(jù)目標(biāo)蛋白的下游應(yīng)用，表達(dá)載體可以搭配一些標(biāo)簽使用，這些特定的標(biāo)簽有助于研究目的蛋白的特性，以及蛋白之間的相互作用;

　　5、啟動(dòng)子

　　啟動(dòng)子的類型有很多，它在很大情況下制約著蛋白的表達(dá)。所以，無論是原核表達(dá)還是真核表達(dá)，我們都需要結(jié)合蛋白的特性及使用目的來挑選合適的啟動(dòng)子，這樣才能更好地進(jìn)行蛋白的表達(dá);

　　6、標(biāo)記選擇

　　標(biāo)記其實(shí)就是一種基因，她可以為目的蛋白添加一種適合人工選擇的性狀。這種標(biāo)記多選擇康生物基因，主要目的是方便后期的陽性克隆篩選;

　　重組蛋白表達(dá)的作用不僅于此，其使用范圍非常的廣泛，當(dāng)然了，對于不同的表達(dá)環(huán)境來說，需要結(jié)合不同的表達(dá)載體來進(jìn)行表達(dá)。在重組蛋白表達(dá)的過程中，有很多細(xì)節(jié)問題需要注意，這樣才能更好地實(shí)現(xiàn)表達(dá)。更多重組蛋白表達(dá)，敬請關(guān)注普健生物。