蛋白提取分離過程中的細(xì)胞破碎的詳細(xì)步驟

　　當(dāng)我們需要進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)部蛋白提取需求時(shí)，我們就需要對(duì)蛋白進(jìn)行破碎操作(有關(guān)細(xì)胞提取和分離的過程可以在“蛋白純化之前常用的一些提取和分離方法簡介”一問查看)。那么，細(xì)胞破碎具體有哪些方法呢?下面普健生物就和大家一一介紹。

　　對(duì)于細(xì)胞破碎的方法，我們需要提前考慮破碎的目的和獨(dú)享類型。細(xì)胞的類型、大小、形態(tài)、生長條件、細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)以及溫度換、PH值等都需要考慮到，綜合這些特性，才能找出最合適的方法。因?yàn)樵谄扑榈倪^程中會(huì)產(chǎn)生熱量，需要提前準(zhǔn)備好冷卻樣品。而且細(xì)胞一旦破碎，就會(huì)失去代謝調(diào)節(jié)機(jī)制的控制，目的蛋白可能會(huì)受到蛋白酶的影響。這個(gè)時(shí)候我們就需要迅速提取出來，或者加入抑制劑，或通過低溫來降低蛋白酶的作用。

　　如下，就是普健生物為大家總結(jié)的幾種常用的細(xì)胞破碎方法及其優(yōu)缺點(diǎn)。

　　1、超聲波法。通過強(qiáng)烈的超聲波迅速造成大量細(xì)胞破裂，破裂效果非常好，而且所需的樣品數(shù)量少，使用最為廣泛，但是不適合用來進(jìn)行大規(guī)模的細(xì)胞破裂，而且對(duì)溫度控制要求較高;

　　2、高速珠磨法。采用高速珠磨碎細(xì)胞，可以快速有效地破裂細(xì)胞，但是破碎的條件相對(duì)難以掌握;

　　3、高壓勻漿法。通過驟然改變細(xì)胞的碰撞、壓力等方式，來實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的被動(dòng)破裂，可以用于大規(guī)模的操作，使用非常的廣泛，但是對(duì)于那些與細(xì)胞膜結(jié)合的蛋白來說，需要進(jìn)行多次破碎才能實(shí)現(xiàn);

　　4、凍融法。將細(xì)胞置于-15度的環(huán)境下冷凍，然后再在室溫下解凍，通過解凍的過程破碎細(xì)胞。這個(gè)方法只適合那些細(xì)胞壁脆弱的類型，破碎率較低，而且容易造成蛋白失活(通常需要大量的時(shí)間);

　　5、酶解法。通過合適的酶來控制細(xì)胞的破裂，需要相對(duì)溫和的條件，而且專一性強(qiáng)，無法實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn);

　　如上就是普健生物為大家總結(jié)的有關(guān)細(xì)胞破裂的幾種操作方法，這些方法都能在一定程度上對(duì)細(xì)胞進(jìn)行破裂。但是很多方法只適合實(shí)驗(yàn)室使用，無法實(shí)現(xiàn)大規(guī)模工業(yè)化的生產(chǎn)。不過，相信在不久的未來，更多更優(yōu)質(zhì)的方法將會(huì)被發(fā)明出來。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供蛋白純化服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。