GST Pull-Down

GST pull-down實(shí)驗(yàn)是一個(gè)有效驗(yàn)證酵母雙雜交系統(tǒng)的體外試驗(yàn)技術(shù)。將靶蛋白質(zhì)-GST融合蛋白質(zhì)親和固化在谷胱甘肽親和樹脂上，作為與目的蛋白質(zhì)親和的支撐物，充當(dāng)“誘餌蛋白質(zhì)”，目的蛋白質(zhì)溶液過柱，可從中捕獲與之相互作用的“捕獲蛋白質(zhì) ( 目的蛋白質(zhì) )”，洗脫結(jié)合物通過SDS-PAGE電泳分離，最后經(jīng) western blot，從而檢測(cè)兩種蛋白質(zhì)間是否有相互作用。

“誘餌蛋白質(zhì)”和“捕獲蛋白質(zhì)”均可通過細(xì)胞裂解物、純化的蛋白質(zhì)、表達(dá)系統(tǒng)以及體外轉(zhuǎn)錄翻譯系統(tǒng)等方法獲得 , 此方法簡(jiǎn)單易行 ，操作方便 。