桿狀病毒昆蟲表達(dá)系統(tǒng)的設(shè)計概念及其構(gòu)建方法

　　桿狀病毒昆蟲表達(dá)系統(tǒng)是現(xiàn)如今使用最為廣泛的表達(dá)系統(tǒng)之一，其不僅能有效提升蛋白表達(dá)效率，而且安全性好，具備良好的生物活性。而且因為其通過感染昆蟲細(xì)胞或幼蟲來表達(dá)外源蛋白，所以不會對哺乳動物產(chǎn)生任何致病性，因此，自誕生以來，就得到了廣泛的應(yīng)用。那么，桿狀病毒昆蟲表達(dá)系統(tǒng)的具體涉及理念及其構(gòu)建方法是怎樣的呢?下面，普健生物就和大家具體聊聊。

　　桿狀病毒昆蟲表達(dá)系統(tǒng)的設(shè)計理念是怎樣的?

　　其實和哺乳動物表達(dá)系統(tǒng)一樣，桿狀病毒昆蟲表達(dá)系統(tǒng)也是通過將外源基因通過剪切、對接等方式，將外源基因加入到昆蟲細(xì)胞中，而后讓目的蛋白隨著昆蟲細(xì)胞的表達(dá)而表達(dá)。之后再通過蛋白析出、純化等一系列的操作，最終獲得我們所需蛋白的方式。

　　桿狀病毒昆蟲表達(dá)系統(tǒng)的構(gòu)建方法是怎樣的?

　　和哺乳動物表達(dá)系統(tǒng)不同，桿狀病毒昆蟲表達(dá)系統(tǒng)主要分為兩種：在昆蟲細(xì)胞內(nèi)重組和在昆蟲細(xì)胞外重組。

　　在昆蟲細(xì)胞內(nèi)重組：

　　最早期常用這個方法，通過將未加修飾的野生病毒進(jìn)行重組，后來發(fā)展成采用線性化的病毒DNA替代，將其與轉(zhuǎn)染載體進(jìn)行昆蟲細(xì)胞共轉(zhuǎn)染時，只要不發(fā)生同源重組，那么，重組率則會高達(dá)100%;

　　而后，大家對這個方法進(jìn)行了改良，比如直接克隆等方法，不僅能避免大腸桿菌內(nèi)的重組，也能有效加速重組的過程。

　　在昆蟲細(xì)胞外重組：

　　通過將外源基因重組到病毒基因中去 ，而且只用重組桿狀病毒DNA去轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞。當(dāng)然了，隨著技術(shù)的發(fā)展，有科協(xié)家利用噬菌體編碼重組酶，讓其提高重組效率，而后在通過染色等手段進(jìn)行重組體的鑒定等;

　　總的來說，桿狀病毒昆蟲表達(dá)系統(tǒng)在一定程度上解決了其他表達(dá)系統(tǒng)的不足之處，無論在方法還是在制備成本上都有著一定的優(yōu)勢，但是也有著一定的不同。不過，我們相信，隨著技術(shù)的不斷發(fā)展，在后期其一定會得到更好的利用。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供蛋白表達(dá)服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。