穩(wěn)定細胞株篩選各過程中的一些注意事項盤點

　　前面我們和大家簡單介紹了一下有關穩(wěn)定細胞株篩選的步驟，讓大家對其有了一定的了解，那么，是不是就可以直接開始實驗了呢?答案是否定的。在穩(wěn)定細胞株篩選的過程中不僅有很多細節(jié)操作問題，還有很多注意事項，稍不注意，就可能造成實驗的失敗。有鑒于此，普健生物今天在這里和大家具體聊聊其注意事項問題。

　　1、篩選前的準備

　　篩選前我們需要確定藥物篩選的相關濃度。對于不同的細胞來說，其對藥物的敏感度是各不相同的，需要在細胞能夠承受的濃度范圍內，否則，很容易造成細胞表達低甚至死亡的情況;

　　2、篩選過程中的注意事項

　　篩選時間：一般在轉染后48小時后進行，而對于慢病毒來說加藥時間一般在72小時;

　　空白對照：在加藥篩選時，需要提前設置好空白對照，全程對比細胞的變化情況;

　　換液操作：當細胞死亡達到一定的程度后，需要及時換液，以避免有害物質造成細胞的死亡;

　　3、克隆篩選過程中的注意事項

　　在進行單克隆篩選的時候，如果有熒光標記，則盡量選擇那些帶有熒光較強的細胞;如果質粒不帶熒光標記，則只能進行盲挑。

　　當然了，無論是否帶有熒光標記，都需要對其進行驗證，而且盡量多挑幾個來進行克隆，以保證成功率;

　　當然了，如上所述也只是注意事項中的一部分，對于不同實驗的不同需求來說，注意事項也是各種各樣的，比如基礎的溫度、PH值等等，這些都需要提前了解好，而后根據(jù)相應的需求來配置相應的環(huán)境，這樣才能有效提升實驗的成功率。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供穩(wěn)定細胞株篩選服務，如果您有相關需求，歡迎來電咨詢。