如何做好穩(wěn)定細(xì)胞株的篩選工作?

　　穩(wěn)定細(xì)胞株廣泛應(yīng)用于重組蛋白、抗體生產(chǎn)、檢測(cè)分析等領(lǐng)域，因?yàn)槠浔磉_(dá)的蛋白穩(wěn)定性好、批次間的差異小，所以，被廣泛使用與醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。我們知道，在穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建的過程中，會(huì)涉及到一個(gè)篩選的過程，今天我們就和大家具體聊聊有關(guān)穩(wěn)定細(xì)胞株篩選方面的工作。

　　如何進(jìn)行穩(wěn)定細(xì)胞株的篩選呢?普健生物今天在這里和大家分享兩種篩選方法。

　　方法一：通過將質(zhì)粒整合到染色體上后，通過單克隆篩選穩(wěn)定細(xì)胞株。

　　1、以10天內(nèi)細(xì)胞全部死亡的抗生素濃度來作為基準(zhǔn)濃度;

　　2、細(xì)胞接種，轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)前接種的細(xì)胞，轉(zhuǎn)染細(xì)胞密度達(dá)到60%-80%的細(xì)胞;

　　3、轉(zhuǎn)染;

　　4、篩選具備抗性的細(xì)胞，并鑒定所篩選的結(jié)果;

　　方法二：利用逆轉(zhuǎn)錄病毒篩選穩(wěn)定細(xì)胞株。

　　1、人源化的抗體基因轉(zhuǎn)接到慢病毒載體上;

　　2、使用包裝細(xì)胞包裝病毒;

　　3、用病毒去轉(zhuǎn)染目的細(xì)胞;

　　4、篩選出合適的細(xì)胞株;

　　其實(shí)大家也不難看出，穩(wěn)定細(xì)胞株篩選的過程其實(shí)都大同小異，大體上的程序基本相同，只是在細(xì)節(jié)方面有著一定的區(qū)別，這也是細(xì)胞株構(gòu)建成功與否的原因所在。普健生物專業(yè)為您構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞株服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。