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盤點穩(wěn)定細胞株構(gòu)建中的幾個重要步驟

發(fā)表時間:2022-12-07 訪問次數(shù):789

  在生物藥品制備的過程中,涉及到很多方法,而且隨著技術(shù)的不斷更新,各種更優(yōu)質(zhì)的方法不斷出現(xiàn),而穩(wěn)定細胞株構(gòu)建則是抗體制備中的佼佼者。細胞株開發(fā)的過程和早期生物藥開發(fā)的方式不同,它的生產(chǎn)步驟主要為:宿主細胞選擇、表達載體、穩(wěn)定性檢測,最后挑選表現(xiàn)最高的單克隆細胞株。對于不同的企業(yè)來說,這個過程是各不相同的,但是,其中有幾個尤為重要的步驟需要引起我們的注意。

  1、制定流程及細胞系選擇

  其實就是制定好詳細的制備流程,同時選擇合適的細胞系制備方式,選擇合適的細胞,做好相應的準備工作,這樣才能在更大程度上保證實驗的進行。我們知道,現(xiàn)階段的抗體藥物都喜歡利用CHO細胞,也是重組抗體藥物制備的細胞系。另外CHO培養(yǎng)過程中可以選擇改良的哺乳動物細胞宿主,用于優(yōu)化其制備過程;

  2、啟動子的合成

  蛋白表達的實質(zhì)其實就是一段DNA的表達,而所謂的啟動子其實就是開啟蛋白表達的標志。而通過優(yōu)化并合成的啟動子能夠提供更多轉(zhuǎn)錄控制,促進生物制藥的研發(fā);

  3、自動化篩選平臺的選擇

  傳統(tǒng)的方法往往采油工手動有限稀釋法來進行篩選,雖然說能篩選出單個細胞,但是通量較低,操作方法復雜也容易造成污染。而自動化篩選不僅能夠短時間內(nèi)將成千上萬個單細胞分離包裹,而且能形成細胞培養(yǎng)和多個單細胞的獨立體系。不僅能夠大量避免手動操作的不足之處,而且能在更大程度上保障其形成單克隆;

  4、細胞的穩(wěn)定生長

  因為細胞在個體中會受到自身分泌的生長因子的影響,而培養(yǎng)液中不存在這類因子,需要手動加入。而且培養(yǎng)基中培養(yǎng)會形成一種抑制細胞生成的物質(zhì),需要去除。滿足培養(yǎng)基中營養(yǎng)的需求,針對每種獨特的細胞株配備合適的培養(yǎng)條件,保證單克隆獲得最佳的存活機會;

  總的來說,穩(wěn)定細胞株構(gòu)建的過程中我們需要為其制備做好各種準備工作,讓其在最佳的環(huán)境下培養(yǎng),同時去除其中會產(chǎn)生的不良物質(zhì),以保證細胞株在最優(yōu)條件下構(gòu)建。只有這樣,產(chǎn)生的細胞株才能夠在更大程度上達到我們的需求。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供穩(wěn)定細胞株構(gòu)建服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。

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