盤(pán)點(diǎn)蛋白表達(dá)中常用的一些蛋白標(biāo)簽及其作用

　　在我們進(jìn)行蛋白表達(dá)時(shí)，常常會(huì)加入一些肽類(lèi)和蛋白，使得其與目的蛋白融合表達(dá)，以便于我們進(jìn)行進(jìn)一步的檢測(cè)、跟蹤和純化。這類(lèi)肽類(lèi)和蛋白，我們稱之為標(biāo)簽蛋白(也叫蛋白標(biāo)簽)。一般來(lái)說(shuō)，蛋白標(biāo)簽對(duì)蛋白本身并不會(huì)起到太大的作用，但是能夠?yàn)槲覀兊鞍妆磉_(dá)的過(guò)程提供相關(guān)佐證。

　　蛋白標(biāo)簽的具體作用：

　　1、識(shí)別。通過(guò)給蛋白添加一些易于識(shí)別的標(biāo)簽，以達(dá)到快速鑒定目的蛋白的目的;

　　2、跟蹤。通過(guò)定位標(biāo)簽確定蛋白在細(xì)胞中的位置，進(jìn)而了解其生理功能和信號(hào)通路等;

　　3、定量。通過(guò)標(biāo)簽來(lái)確定蛋白的量;

　　4、純化。通過(guò)識(shí)別標(biāo)簽來(lái)對(duì)蛋白進(jìn)行相關(guān)純化工作;

　　常見(jiàn)的標(biāo)簽蛋白及其特點(diǎn)：

　　1、his標(biāo)簽。其特點(diǎn)是分子量小，不會(huì)影響到蛋白的理化性質(zhì)，免疫原性低，主要用于蛋白純化;

　　2、FLAG標(biāo)簽。其特點(diǎn)是分子量小，不會(huì)改變?nèi)诤系鞍坠δ?，含有一個(gè)腸激酶切割位點(diǎn)，以便于標(biāo)簽的去除。主要用于免疫沉淀、免疫熒光以及ELISA制備;

　　3、GST標(biāo)簽。特點(diǎn)是可用于增加外源蛋白可溶性，在大腸桿菌中科實(shí)現(xiàn)大量表達(dá)，特異性高，純化方便;可用于蛋白純化、酶學(xué)分析以及免疫分析;

　　4、c-Myc標(biāo)簽。特點(diǎn)是以人Myc基因的一部分而盡量避免人源細(xì)胞的相關(guān)實(shí)驗(yàn)。主要用于WB、免疫沉淀、免疫熒光以及流式細(xì)胞術(shù)等;

　　5、HA標(biāo)簽。特點(diǎn)是對(duì)外源蛋白空間結(jié)構(gòu)影響小，容易構(gòu)成標(biāo)簽蛋白。主要用于蛋白純化、ELISA以及免疫沉淀等;

　　當(dāng)然了，雖然說(shuō)很多標(biāo)簽都適用于蛋白純化等操作，但是也要結(jié)合實(shí)際情況來(lái)進(jìn)行選擇，這樣不僅能提升蛋白制備的成功率，也能在更大程度上滿足標(biāo)簽蛋白的需求，當(dāng)然了，制備成本也能得到很好的控制。武漢蒲建設(shè)橫五專(zhuān)業(yè)為廣大用戶提供蛋白制備服務(wù)，如果您有香瓜需求，歡迎來(lái)電咨詢。