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說(shuō)到重組蛋白表達(dá)，相信大家已經(jīng)不再陌生了，因?yàn)樵谝恍┧幤返氖褂弥袝?huì)經(jīng)常使用到。而對(duì)于實(shí)驗(yàn)室來(lái)說(shuō)，重組蛋白制備實(shí)驗(yàn)可以說(shuō)是非常的常見(jiàn)，而且操作起來(lái)也非常的規(guī)范。那么，蛋白的制備是不是就非常的簡(jiǎn)單了呢?其實(shí)不然!在日常重組蛋白表達(dá)的實(shí)驗(yàn)中，我們需要注意如下的一些事項(xiàng)。
1、如何得到可溶性的蛋白
這個(gè)問(wèn)題也是我們蛋白表達(dá)過(guò)程中最常見(jiàn)的問(wèn)題之一，雖然說(shuō)蛋白表達(dá)出來(lái)了，但是卻不溶，導(dǎo)致所得蛋白無(wú)法使用。一般這個(gè)情況，就是因?yàn)槲覀冞x擇的表達(dá)菌株不對(duì)，需要更換合適的菌株才行;
2、如何讓蛋白產(chǎn)量最大化
主要還是因?yàn)闇囟鹊木壒省＝?jīng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在37度的環(huán)境下，蛋白容易出現(xiàn)包涵體，而在30度的時(shí)候，可溶性蛋白的產(chǎn)量會(huì)提升，15-20度的環(huán)境下，誘導(dǎo)性蛋白的產(chǎn)量會(huì)達(dá)到最大;
3、如何避免包涵體和內(nèi)毒素的產(chǎn)生
包涵體的產(chǎn)生主要是因?yàn)榈鞍兹芙庑赃_(dá)到最大后，導(dǎo)致蛋白析出的情況。所以，這個(gè)時(shí)候我們不妨換個(gè)角度，用無(wú)細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)來(lái)試試，通過(guò)實(shí)驗(yàn)，它不僅能有效避免包涵體、內(nèi)毒素等物質(zhì)的產(chǎn)生，而且蛋白表達(dá)率也很高;
當(dāng)然了，重組蛋白表達(dá)需要注意的事項(xiàng)并不止我們說(shuō)的如上幾個(gè)方面，具體操作中很多細(xì)節(jié)方面也要引起注意，否則也可能會(huì)造成蛋白表達(dá)的失敗。當(dāng)然了，按照相關(guān)文獻(xiàn)給與的方式操作下來(lái)，一般都不會(huì)出現(xiàn)太大問(wèn)題，只是因?yàn)橄嚓P(guān)投入與產(chǎn)出難成正比，制備的蛋白無(wú)法滿足實(shí)驗(yàn)需求等問(wèn)題，可能會(huì)對(duì)您造成困擾。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供重組蛋白制備服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢。
